Controllability of protein-protein interaction phosphorylation-based networks: Participation of the hub 14-3-3 protein family

Posttranslational regulation of protein function is an ubiquitous mechanism in eukaryotic cells. Here, we analyzed biological properties of nodes and edges of a human protein-protein interaction phosphorylation-based network, especially of those nodes critical for the network controllability. We found that the minimal number of critical nodes needed to control the whole network is 29%, which is considerably lower compared to other real networks. These critical nodes are more regulated by posttranslational modifications and contain more binding domains to these modifications than other kinds of nodes in the network, suggesting an intra-group fast regulation. Also, when we analyzed the edges characteristics that connect critical and non-critical nodes, we found that the former are enriched in domain-to-eukaryotic linear motif interactions, whereas the later are enriched in domain-domain interactions. Our findings suggest a possible structure for protein-protein interaction networks with a densely interconnected and self-regulated central core, composed of critical nodes with a high participation in the controllability of the full network, and less regulated peripheral nodes. Our study offers a deeper understanding of complex network control and bridges the controllability theorems for complex networks and biological protein-protein interaction phosphorylation-based networked systems.Fil: Uhart, Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Cienicas Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Flores, Gabriel. Eventioz/eventbrite Company; ArgentinaFil: Bustos, Diego Martin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Cienicas Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentin

On the role of residue phosphorylation in 14-3-3 partners: AANAT as a case study

Twenty years ago, a novel concept in protein structural biology was discovered: the intrinsically disordered regions (IDRs). These regions remain largely unstructured under native conditions and the more are studied, more properties are attributed to them. Possibly, one of the most important is their ability to conform a new type of protein-protein interaction. Besides the classical domain-to-domain interactions, IDRs follow a ´fly-casting´ model including ´induced folding´. Unfortunately, it is only possible to experimentally explore initial and final states. However, the complete movie of conformational changes of protein regions and their characterization can be addressed by in silico experiments. Here, we simulate the binding of two proteins to describe how the phosphorylation of a single residue modulates the entire process. 14-3-3 protein family is considered a master regulator of phosphorylated proteins and from a modern point-of-view, protein phosphorylation is a three component system, with writers (kinases), erasers (phosphatases) and readers. This later biological role is attributed to the 14-3-3 protein family. Our molecular dynamics results show that phosphorylation of the key residue Thr31 in a partner of 14-3-3, the aralkylamine N-acetyltransferase, releases the fly-casting mechanism during binding. On the other hand, the non-phosphorylation of the same residue traps the proteins, systematically and repeatedly driving the simulations into wrong protein-protein conformations.Fil: Masone, Diego Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Cienicas Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ingeniería; ArgentinaFil: Uhart, Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Cienicas Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Bustos, Diego Martin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Cienicas Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentin

Differential expression and accumulation of 14-3-3 paralogs in 3T3-L1 preadipocytes and differentiated cells

The 14-3-3 protein family interacts with more than 2000 different proteins in mammals, as a result of its specific phospho-serine/phospho-threonine binding activity. Seven paralogs are strictly conserved in mammalian species. Here, we show that during adipogenic differentiation of 3T3-L1 preadipocytes, the level of each 14-3-3 protein paralog is regulated independently. For instance 14-3-3β, γ, and η protein levels are increased compared to untreated cells. In contrast, 14-3-3ε protein levels decreased after differentiation while others remained constant. In silico analysis of the promoter region of each gene showed differences that explain the results obtained at mRNA and protein levels.Fil: Gojanovich, Aldana Daniela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Cienicas Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Bustos, Diego Martin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Cienicas Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Uhart, Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Cienicas Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentin

Protein intrinsic disorder and network connectivity. The case of 14-3-3 proteins

The understanding of networks is a common goal of an unprecedented array of traditional disciplines. One of the protein network properties most influenced by the structural contents of its nodes is the inter-connectivity. Recent studies in which structural information was included into the topological analysis of protein networks revealed that the content of intrinsic disorder in the nodes could modulate the network topology, rewire networks, and change their inter-connectivity, which is defined by its clustering coefficient. Here, we review the role of intrinsic disorder present in the partners of the highly conserved 14-3-3 protein family on its interaction networks. The 14-3-3s are phospho-serine/threonine binding proteins that have strong influence in the regulation of metabolism and signal transduction networks. Intrinsic disorder increases the clustering coefficients, namely the inter-connectivity of the nodes within each 14-3-3 paralog networks. We also review two new ideas to measure intrinsic disorder independently of the primary sequence of proteins, a thermodynamic model and a method that uses protein structures and their solvent environment. This new methods could be useful to explain unsolved questions about versatility and fixation of intrinsic disorder through evolution. The relation between the intrinsic disorder and network topologies could be an interesting model to investigate new implicitness of the graph theory into biology.Fil: Uhart, Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas ; ArgentinaFil: Bustos, Diego Martin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas ; Argentin

14-3-3γ silencing impairs osteogenic differentiation of human adipose derived-mesenchymal stem cells

14-3-3proteins constitute a family of regulatory molecules that participatein a plethora of cellular processes mainly through protein-proteininteractions. Even though 14-3-3 protein family members show somefunctional redundancy, there is growing evidence that indicatesevolutionary and biochemical diversity. Consistent with theliterature, previous research from our laboratory showed thatexpression levels of 14-3-3 paralogs are independently regulatedduring the adipogenesis and osteogenesis of human adiposederived-mesenchymal stem cells (hASCs). In the current work, we useda validated approach to isolate hASCs and studied the implication of14-3-3γon the osteogenic commitment of these cells. To address this purpose,we delivered a 14-3-3γshRNA construct into hASCs by pAd-BLOCKiT, an adenoviral vectorcontaining a human U6 promoter, and examined the effect on thedifferentiation potential into osteoblasts. The latter was evaluatedby: i) measuring alkaline phosphatase (ALP) activity, an early-stageosteoblast differentiation biomarker, and ii) detectingRunt-related transcription factor 2 (Runx2, master regulator of boneformation) protein levels. Cells were either maintained for 14 dayswith standard growth media (control, low glucose DMEM; 5% FBS) orinduced with an osteogenic differentiation medium (ODM; an optimizeddrug cocktail that includes dexamethasone, β-glycerophosphate,and 2-phospho-L-ascorbic acid). Our results clearly showed a decreasein both Runx2 protein levels and ALP activity in 14-3-3γdepleted hASCs. This also accords with our earlier observations,which showed that reduced expression of 14-3-3γhad a negative impact on the osteoblastic transdifferentiation ofNIH3T3-L1 cells. Taken together, these findings suggest a regulatoryrole for 14-3-3γin hASC differentiation to the osteogenic lineage.Fil: Rivera, Lautaro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Bustos, Diego Martin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Uhart, Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaLVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigaciónes en Bioquímica y Biología MolecularMendozaArgentinaSociedad Argentina de Investigaciónes en Bioquímica y Biología Molecula

Revision of the genera Agrocybe and Cyclocybe (Strophariaceae, Agaricales, Basidiomycota) in Argentina

Agrocybe se caracteriza por sus basidiomas collibiodes a tricholomatoides, esporada con coloraciones ferrugineas a oscuras, pileipellis himeniforme y esporas con poro germinativo. Recientemente, las especies con poro germinativo reducido fueron segregadas a Cyclocybe. El conocimiento de estos géneros en Argentina es escaso, aunque hay estudios parciales de varios micólogos, no hay un trabajo que lo trate exhaustivamente en forma conjunta. Se analizaron caracteres macro y micromorfológicos de especímenes colectados y de diferentes herbarios nacionales (BAFC, CTES, LIL, LPS). Se utilizaron técnicas de cultivo para obtener basidiomas, lo que permitió un estudio macro y micromorfológico de material fresco en desarrollo. Concluimos que en Argentina hay, hasta el momento, 14 especies de Agrocybe (una de ellas con tres variedades), y dos especies de Cyclocybe, incluyendo a C. wrightii, la cual es propuesta como una nueva combinación. Se describen dieciséis especies y se propone una clave para las especies argentinas de Agrocybe y Cyclocybe.Agrocybe is characterized by the collybioid to tricholomatoid basidiomata with rusty to dark spore-print, a hymeniform pileipellis, and basidiosspores with a reduced to broad germ-pore. Recently, the species with reduced germ-pore were segregated to Cyclocybe. The knowledge of these genera in Argentina is scanty, although they have been partially studied in the country, but there is not a field that deals exhaustively with it. Macro- and micromorphological characters of specimens obtained in the feld and from different national herbaria (BAFC, CTES, LIL, LPS) were analyzed. Cultivation techniques were used to obtain basidiomata, allowing for a macro- and micromorphological study of fresh developing basidiomes. We concluded that in Argentina there are, so far, 14 species of Agrocybe (one of them with 3 varieties) and two of Cyclocybe including to C. wrightii, which is proposed as a new combination. Sixteen species are described and a key to the Argentinian species of Agrocybe and Cyclocybe is proposed.Fil: Niveiro, Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Uhart, Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Alberto, Edgardo Omar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); Argentin

Freely Available Tool (FAT) for automated quantification of lipid droplets in stained cells

In this study, wepropose an automatic procedure for digital image processing. Wedescribe a method that can efficiently quantify and characterizelipid droplets distributions in different cell types in culture.Prospectively, the lipid droplets detection method described in thiswork could be applied to static or time-lapse data, collected with asimple visible light or fluorescence microscopy equipment. Fullyautomated algorithms were implemented in Octave, a freely availablescientific package.Fil: Masone, Diego Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ingeniería; ArgentinaFil: Gojanovich, Aldana Daniela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Frontini López, Yesica Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: del Veliz, Samanta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Uhart, Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Bustos, Diego Martin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentin

Analysis of SARS-CoV-2 nucleocapsid phosphoprotein N variations in the binding site to human 14-3-3 proteins

The SARS-CoV-2 N protein binds several cell host proteins including 14-3-3g, a well-characterized regulatory protein. However, the biological function of this interaction is not completely understood. We analyzed the variability of ~90 000 sequences of the SARS-CoV-2 N protein, particularly, its mutations in disordered regions containing binding motifs for 14-3-3 proteins. We studied how these mutations affect the binding energy to 14-3-3g and found that changes positively affecting the predicted interaction with 14-3-3g are the most successfully spread, with the highest prevalence in the phylogenetic tree. Although most residues are highly conserved within the 14-3-3 binding site, compensatory mutations to maintain the interaction energy of N-14-3-3g were found, including half of the current variants of concern and interest. Our results suggest that binding of N to 14-3-3g is beneficial for the virus, thus targeting this viral-host protein-protein interaction seems an attractive approach to explore antiviral strategies.Fil: del Veliz, Samanta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Rivera, Lautaro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Bustos, Diego Martin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Uhart, Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentin

14-3-3ε protein-loaded 3D hydrogels favor osteogenesis

3D printing has emerged as vanguard technique of biofabrication to assemble cells, biomaterials and biomolecules in a spatially controlled manner to reproduce native tissues. In this work, gelatin methacrylate (GelMA)/alginate hydrogel scaffolds were obtained by 3D printing and 14-3-3ε protein was encapsulated in the hydrogel to induce osteogenic differentiation of human adipose-derived mesenchymal stem cells (hASC). GelMA/alginate-based grid-like structures were printed and remained stable upon photo-crosslinking. The viscosity of alginate allowed to control the pore size and strand width. A higher viscosity of hydrogel ink enhanced the printing accuracy. Protein-loaded GelMA/alginate-based hydrogel showed a clear induction of the osteogenic differentiation of hASC cells. The results are relevant for future developments of GelMA/alginate for bone tissue engineering given the positive effect of 14-3-3ε protein on both cell adhesion and proliferation.Fil: Aldana, Ana Agustina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Ciencia y Tecnología de Materiales. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ingeniería. Instituto de Investigaciones en Ciencia y Tecnología de Materiales; ArgentinaFil: Uhart, Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Mendoza. Instituto de Histologia y Embriologia de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Grupo Vinculado de Investigacion y Desarrollo Biotecnologico Aplicado Al Diagnostico Al Ihem | Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Medicas. Instituto de Histologia y Embriologia de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Grupo Vinculado de Investigacion y Desarrollo Biotecnologico Aplicado Al Diagnostico Al Ihem.; ArgentinaFil: Abraham, Gustavo Abel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Ciencia y Tecnología de Materiales. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ingeniería. Instituto de Investigaciones en Ciencia y Tecnología de Materiales; ArgentinaFil: Bustos, Diego Martin. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Mendoza. Instituto de Histologia y Embriologia de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Grupo Vinculado de Investigacion y Desarrollo Biotecnologico Aplicado Al Diagnostico Al Ihem | Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Medicas. Instituto de Histologia y Embriologia de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Grupo Vinculado de Investigacion y Desarrollo Biotecnologico Aplicado Al Diagnostico Al Ihem.; ArgentinaFil: Boccaccini, Aldo Roberto. Universitat Erlangen-Nuremberg; Alemani

Adipose-derived mesenchymal stem/stromal cells: from the lab bench to the basic concepts for clinical translation

In the last years, much work has shown that the most effective repair system of the body is represented by stem cells, which are defined as undifferentiated precursors that own unlimited or prolonged self-renewal ability, which also have the potential to transform themselves into various cell types through differentiation.All tissues that form the body contain many different types of somatic cells, along with stem cells that are called ‘mesenchymal stem (or stromal) cells’ (MSC). In certain circumstances, some of these MSC migrate to injured tissues to replace dead cells or to undergo differentiation to repair it.The discovery of MSC has been an important step in regenerative medicine because of their high versatility. Moreover, the finding of a method to isolate MSC from adipose tissue, so called ‘adipose-derived mesenchymal stem cells’ (ASC), which share similar differentiation capabilities and isolation yield that is greater than other MSC, and less bioethical concerns compared to embryonic stem cells, have created self-praised publicity to procure almost any treatment with them. Here, we review the current techniques for isolation, culture and differentiation of human ASC (hASC), and describe them in detail. We also compile some advantages of the hASC over other stem cells, and provide some concepts that could help finding strategies to promote their therapeutic efficiency.Fil: Frontini López, Yesica Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Gojanovich, Aldana Daniela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Masone, Diego Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Facultad de Ingeniería, Universidad Nacional de Cuyo, Mendoza; ArgentinaFil: Bustos, Diego Martin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad Nacional de Cuyo, Mendoza; ArgentinaFil: Uhart, Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentin